دوره 16، شماره 4 - ( 1392 )                   جلد 16 شماره 4 صفحات 27-37 | برگشت به فهرست نسخه ها

XML English Abstract Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Jahandar H, Khalaj V, Nematollahi L, Zandi F, Enayati S, Vaziri B. The Effects of Recombinant IgG4 Expression on the Growth of Sp2.0 Cell Lines. MJMS. 2014; 16 (4) :27-37
URL: http://journals.modares.ac.ir/article-30-12218-fa.html
جهاندار هدی، خلج وحید، نعمت الهی لیلا، زندی فاطمه، عنایتی سمیه، وزیری بهروز. تأثیر بیان پایدار IgG4 نوترکیب بر رشد سلول‏های Sp2.0. پژوهش‌های آسیب‌شناسی زیستی. 1392; 16 (4) :27-37

URL: http://journals.modares.ac.ir/article-30-12218-fa.html


1- مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران
چکیده:   (3908 مشاهده)
هدف: مطالعه تغییرات فیزیولوژیک سلول‏های نوترکیب در مقایسه با سلول‏های والد، اطلاعات مفیدی برای بهبود کارآیی فرایند تولید فراهم می‏نماید. در این مطالعه تأثیر بیان IgG4 کایمریک علیه نشانگر CD33 بر رشد سلول Sp2.0 بررسی شده است. مواد و روش‏ها: ژن‏های نواحی متغیر زنجیره‏های سبک و سنگین آنتی‏بادی تولید شده توسط سلول M195 به ترتیب در ناقل‏های pFUSE-CLIg-hk و pFUSE-CHIg-hG4 همسانه‏سازی شد. پلاسمیدهای نوترکیب در دو مرحله با استفاده از لیپوفکتامین به سلول‏های Sp2.0 منتقل شد. سلول‏های پایدار در محیط حاوی آنتی‏بیوتیک‏های بلاستیسیدین و زئوسین انتخاب شدند. الحاق سازه نوترکیب به ژنوم سلول‏های تراریخت مقاوم به آنتی‏بیوتیک‏ها و همچنین بیان IgG4 با استفاده از روش‏های PCR، RT-PCR و وسترن بلات بررسی شد. برای مطالعه پارامترهای کینتیکی، سلول‏های والد و نوترکیب با چگالی 105×1 سلول در هر میلی‏لیتر محیط کشت در پلیت 12 خانه به مدت 9 روز انکوبه شدند و هر 24 ساعت از سلول‏ها نمونه‏برداری شد و شمارش تعداد سلول زنده و محاسبه درصد زنده بودن انجام گرفت. نتایج: بر اساس نتایج PCR، RT-PCR و وسترن بلات، ایجاد سلول تولید کننده پایدار IgG4 تأیید شد. این مطالعه نشان داد که حداکثر چگالی سلولی برای سلول‏های نوترکیب در مقایسه با سلول‏های والد 46 درصد کاهش یافته است در حالی که در این نمونه‏ها درصد سلول‏های زنده تغییری نکرده است. نتیجه‏گیری: بر اساس نتایج این تحقیق بیان IgG4 کایمریک در سیستم Sp2.0/pFUSE-CHIg-hG4-pFUSE-CLIg-hk باعث تغییر برخی از پارامترهای رشدی سلول میزبان می‏شود.
متن کامل [PDF 943 kb]   (2678 دریافت)    
نوع مقاله: مقاله پژوهشی | موضوع مقاله: بیوتکنولوژی
دریافت: ۱۳۹۲/۱۰/۱۵ | پذیرش: ۱۳۹۲/۱۱/۱۳ | انتشار: ۱۳۹۲/۱۱/۱۳

ارسال نظر درباره این مقاله : نام کاربری یا پست الکترونیک شما:
CAPTCHA code