دوره 21، شماره 2 - ( 1397 )                   جلد 21 شماره 2 صفحات 101-106 | برگشت به فهرست نسخه ها

XML English Abstract Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Hamid M, Morovati Sharif Abad ‎ S. Designing a Rapid Screening Method for Detection of Four ‎Common Beta Globin Gene Mutations in Iranian Population by ‎High-Resolution Melting Analysis. MJMS. 2018; 21 (2) :101-106
URL: http://journals.modares.ac.ir/article-30-1253-fa.html
حمید محمد، مروتی‌شریف‌آباد ‌ سمیه. طراحی روش غربالگری سریع چهار جهش شایع ژن بتاگلوبین در جمعیت ایران با ‌استفاده از روش منحنی ذوب با تفکیک بالا. پژوهش‌های آسیب‌شناسی زیستی. 1397; 21 (2) :101-106

URL: http://journals.modares.ac.ir/article-30-1253-fa.html


1- بخش پزشکی مولکولی، مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران ، hamid143@yahoo.com
2- بخش پزشکی مولکولی، مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران
چکیده:   (137 مشاهده)
اهداف: تالاسمی بتا، یک بیماری خونی و ژنتیکی است، شیوع ناقلین این بیماری در جمعیت ایران بالاست. بررسی غربالگری قبل از ازدواج برای تعیین ناقلین تالاسمی بتا، به تشخیص سریع و قابل اعتماد نیاز دارد. هدف پژوهش حاضر طراحی روش غربالگری سریع چهار جهش‌ شایع ژن بتا گلوبین جمعیت ایران با استفاده از روش ذوب با تفکیک بالا (HRM) بود.
مواد و روش‌ها: در مطالعه تجربی حاضر هشت نمونه از افراد مبتلا و ناقل تالاسمی بتا با ژنوتیپ‌های (G>A) IVSI-۱۱۰، A) IVSII-I (G>، (IVSI-۵ (G>C و CD۳۶/۳۷ (-T) در شرایط هموزیگوت و هتروزیگوت و یک نمونه کنترل (فرد سالم) انتخاب شدند. بعد از گرفتن خون، استخراج DNA با روش نمکی انجام شد. برای اطمینان، نمونه‌ها به‌صورت دوتایی ران شدند و دو نمونه کنترل بدون DNA نیز به‌کار رفت. آغازگرها، با کمک نرم‌افزارهای Gene Runner ۶.۰.۲۸، Primer Express v ۳.۰.۱ ۳/۱) و Primer۳ v. ۰.۴.۰ طراحی شدند و روش HRM برای تعیین جهش‌های فوق به‌کار رفت.
یافته‌ها: بهترین غلظت مناسب DNA، ۵نانوگرم بر میکرولیتر به‌دست آمد. در مرحله تفاوت نمودار به‌وضوح تفاوت منحنی‌ها در شرایط هتروزیگوت، نرمال و هموزیگوت مشاهده شد. در جهش IVSII-IG>A در منحنی ذوب برخلاف انتظار دو قله در نمونه‌ها دیده شد، علت آن حضور یک پلی‌مورفیسم در نزدیکی جهش بود.
نتیجه‌گیری: روش HRM قابلیت تشخیص چهار جهش شایع ژن بتاگلوبین را دارد و می‌تواند بین فرد هتروزیگوت و هموزیگوت و فرد سالم نیز در یک جهش واحد افتراق ایجاد کند. روش HRM توان بالایی داشته و می‌تواند ۹۶ نمونه DNA را در مدت دو ساعت آنالیز کند.
واژه‌های کلیدی: بتا تالاسمی، جهش، ایران
متن کامل [PDF 439 kb]   (39 دریافت)    
نوع مقاله: مقاله پژوهشی |
دریافت: ۱۳۹۶/۹/۲ | پذیرش: ۱۳۹۶/۱۱/۱۸ | انتشار: ۱۳۹۷/۴/۱۴

ارسال نظر درباره این مقاله : نام کاربری یا پست الکترونیک شما:
CAPTCHA code

ارسال پیام به نویسنده مسئول