دوره 14، شماره 4 - ( 1390 )                   جلد 14 شماره 4 صفحات 99-107 | برگشت به فهرست نسخه ها

XML English Abstract Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Shahab Movahhed Z, Zeinali S, Aslani M M. A Study of the Stability of Escherichia coli on DNA Banking Card (DBC) for Molecular Tests. MJMS. 2012; 14 (4) :99-107
URL: http://journals.modares.ac.ir/article-30-1883-fa.html
شهاب موحد زهرا، زینلی سیروس، اصلانی محمد مهدی. بررسی پایداری DNA اشریشیا کلی روی کارت نگهداری DNA برای انجام آزمایش‏های مولکولی. پژوهش‌های آسیب‌شناسی زیستی. 1390; 14 (4) :99-107

URL: http://journals.modares.ac.ir/article-30-1883-fa.html


1- گروه میکروب‏شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه آزاد اسلامی واحد قم، ایران
2- مرکز بیوتکنولوژی پزشکی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران مرکزتحقیقات ژنتیک انسانی کوثر، تهران، ایران
3- بخش میکروب‏شناسی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران
چکیده:   (2930 مشاهده)
هدف: برای نگهداری DNA میکروارگانیسم‏ها از روش‏های سنتی نگهداری در دمای پایین 4،20- و80- درجه سانتی‏گراد استفاده می‏شود. کارت DBC یک روش نوین نگهداری DNA در دمای اتاق است. پ‍‍ژوهش حاضر به‏منظور بررسی پایداری DNA باکتری و تعیین بهترین روش نگهداری DNA روی کارت نگهداری DNA طراحی شد. مواد و روش‏ها: از یک جفت آغازگر از قسمت حفاظت شده دومین 16 srRNA برای شناسایی اشریشیا کلی استفاده شد و چهار نوع مختلف نمونه باکتریایی شامل سوسپانسیون باکتری، DNA خالص باکتری به روش فنل- کلروفرم، باکتری لیز شده با بافر لیز کننده و DNA باکتری با روش جوشاندن تهیه و در روی کارت جداگانه ریخته و در دمای اتاق خشک شد. سپس در زمان‏های 3 ،5 و 7 ماه پایداری DNA باکتری اشریشیا کلی با دو روش مولکولی PCR مرسوم با تعداد 1، 2، 3 دیسک (به قطر 1 میلی‏متر) به‏عنوان منبعی از DNA باکتری و Real-Time PCR بررسی شد. نتایج: DNA باکتری پس از هفت ماه روی یک دیسک از کارت نگهداری DNA پایداری خود را حفظ نمود و حتی یک پانچ از دیسک به‏عنوان منبع DNA کافی بود. اما نتایج بررسی حاضر نشان داد که سوسپانسیون باکتری بهترین روش نگهداری طولانی مدت DNA باکتری روی کارت نگهداری DNA است. نتیجه‏گیری: در روش‏های سنتی نگهداری DNA، پس از منجمد و ذوب شدن DNA کیفیت آن کاهش می‏یابد اما در روش کارت نگهداری DNA کیفیت DNA برای زمان طولانی‏تر حفظ می‏شود و علاوه برآن این روش مزایایی مانند آسانی در کارکردن با نمونه، قیمت پایین، تخلیص سریع‏تر و در نهایت کاهش آلودگی فردی و محیطی را دارد.
متن کامل [PDF 788 kb]   (3555 دریافت)    
نوع مقاله: مقاله کوتاه | موضوع مقاله: باکتری شناسی
دریافت: ۱۳۹۰/۹/۱۸ | پذیرش: ۱۳۹۰/۱۱/۲۳ | انتشار: ۱۳۹۰/۱۲/۶

ارسال نظر درباره این مقاله : نام کاربری یا پست الکترونیک شما:
CAPTCHA code