دوره 14، شماره 4 - ( 1390 )                   جلد 14 شماره 4 صفحات 1-12 | برگشت به فهرست نسخه ها

XML English Abstract Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Aghababa H, Mohabbati Mobarez A, Behmanesh M, Khoramabadi N, Nejati M. Cloning, Expression and Purification of Mycolyltransferase C of Mycobacterium tuberculosis in prokaryotic host. MJMS. 2012; 14 (4) :1-12
URL: http://journals.modares.ac.ir/article-30-11841-fa.html
آقابابا هانیه، محبتی مبارز اشرف، بهمنش مهرداد، خرم آبادی نیما، نجاتی مهدی. کلون، بیان و تخلیص مایکولیل ترانسفراز C مایکوباکتریوم توبرکلوزیس در میزبان پروکاریوتی. پژوهش‌های آسیب‌شناسی زیستی. 1390; 14 (4) :1-12

URL: http://journals.modares.ac.ir/article-30-11841-fa.html


1- گروه باکتری‏شناسی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران
2- گروه باکتری شناسی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران
3- گروه ژنتیک، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران
4- سرپرست بخش واکسن‏های باکتریایی، مجتمع تولیدی و تحقیقاتی انستیتو پاستور، انستیتو پاستور ایران، البرز، ایران
چکیده:   (2887 مشاهده)
هدف: کمپلکس آنتی‏ژن 85 مایکوباکتریوم توبرکلوزیس شامل سه پروتئین ترشحی است که خاصیت ایمنی‏زایی دارند. این پروتئین‏ها کاندیداهای مهمی در طراحی واکسن سل هستند. برای استفاده از این پروتئین‏ها به‏عنوان واکسن‏های زیرواحدی یا به‏عنوان یادآور برای BCG نوترکیب یا واکسن‏های DNA، تولید آنتی‏ژن‏های پروتئینی به شکل نوترکیب الزامی است. پروتئین‏های مایکوباکتریوم که در دیواره هستند نسبتاً غیرقطبی است و تولید آن‏ها به شکل نوترکیب در سویه بیانی اشریشیا کلی با پروتئین‏های دیگر متفاوت است. هدف از این مطالعه تولید و تخلیص آنتی‏ژن نوترکیب 85C به‏عنوان یک ایمنوژن است. مواد و روش‏ها: آنتی‏ژن 85C در حامل پلاسمیدی pJET1.2 و در نهایت در pET32a(+) کلون و در هر دو پلاسمید تعیین توالی شد. القای تولید پروتئین با IPTG صورت گرفت و تخلیص با حل کردن اجسام توده‏ای داخل سلولی در اوره، جذب با رزین نیکل، حذف اوره با شیب کاهشی اوره در محلول‏های شستشو و در نهایت جمع‏آوری پروتئین نوترکیب به شکل محلول انجام شد. تأیید آنتی‏ژنیک پروتئین نوترکیب با وسترن بلات و توسط آنتی‏بادی ضد پلی‏هیستیدین، آنتی سرم پلی‏کلونال خرگوشی ضد مایکوباکتریوم توبرکولوزیس و سرم بیمار سلی بستری انجام شد. نتایج: ژن آنتی‏ژن 85C با موفقیت کلون و با تعیین توالی تأیید شد. آنتی‏ژن 85C در میزبان اشریشیا کلی بیان و تخلیص شد. نتیجه‏گیری: نتایج وسترن بلات به موازات نتایج تعیین توالی نشان دهنده درستی تولید پروتئین آنتی‏ژن 85C نوترکیب و حفظ نسبی ساختار اپی‏توپی آن است.
متن کامل [PDF 1025 kb]   (4263 دریافت)    
نوع مقاله: مقاله پژوهشی | موضوع مقاله: ملکولی|باکتری شناسی
دریافت: ۱۳۹۰/۳/۴ | پذیرش: ۱۳۹۰/۹/۱۶ | انتشار: ۱۳۹۰/۱۰/۱۴

ارسال نظر درباره این مقاله : نام کاربری یا پست الکترونیک شما:
CAPTCHA code