دوره 22، شماره 1 - ( 1397 )                   جلد 22 شماره 1 صفحات 27-34 | برگشت به فهرست نسخه ها

XML English Abstract Print


1- گروه زیست‌شناسی، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران
2- گروه هماتولوژی و بانک خون، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران ، soleim_m@modares.ac.ir
3- گروه میکروب‌شناسی، پردیس علوم پایه، دانشکده زیست‌شناسی، دانشگاه تهران، تهران، ایران
4- گروه بیولوژی مولکولی و مهندسی ژنتیک، مرکز تحقیقات فناوری بن یاخته، تهران، ایران
چکیده:   (285 مشاهده)
اهداف: گلیوبلاستوما مولتی‌فرم یکی از انواع سرطان‌های مغزی است که پاسخ مناسبی به درمان نشان نمی‌دهد. پیش‌آگهی بد این بیماری به‌دلیل وجود حالت مقاومت به پرتو و شیمی‌درمانی است. هدف مطالعه حاضر تولید ویروس لنتی حامل پیش‌ساز miR-579 و بررسی تاثیر افزایش بیان miR-579 بر بیان ژن‌های BAX و CDKN1A در رده سلولی گلیوبلاستوما بود.
مواد و روش‌ها: در مطالعه تجربی حاضر برای تولید ویروس لنتی نوترکیب قطعه ژنی حاوی توالی پیش‌ساز miR-579 در پلاسمید pCDH همسانه‌سازی شد. سازه نوترکیب به‌همراه پلاسمیدهای psPAX و pMD2 به سلول‌های HEK293T انتقال داده شد. ذرات ویروسی با روش اولتراسانتریفیوژ تغلیظ شدند. تیتر ویروسی با روش فلوسایتومتری محاسبه شد. ذرات ویروسی تولیدشده به دومان سلولی A-172 انتقال داده شدند. در نهایت با بهره‌گیری از روش PCR در زمان واقعی تغییرات، سطوح بیانی miR-579 و ژن‌های BAX و CDKN1A بررسی شدند.
یافته‌ها: حضور پیش‌ساز ژن miR-579 در پلاسمید با کمک روش‌های کلونی PCR و توالی‌یابی مورد تایید قرار گرفت. بررسی‌ها نشان دادند که سطح بیان miR-579 در سلول‌های آلوده‌شده با ویروس نوترکیب در مقایسه با گروه کنترل افزایش هفت‌برابری یافت. افزایش بیان miR-579 منجر به افزایش بیان ژن BAX تا سه‌برابر شد اما در مقابل تغییر معنی‌داری در بیان ژن CDKN1A مشاهده نشد.
نتیجه‌گیری: افزایش بیان miR-579 در رده سلولی A-172 می‌تواند بیان ژن BAX را افزایش دهد؛ اما در بیان ژن CDKN1A تغییر معنی‌داری ایجاد نمی‌کند.
واژه‌های کلیدی: miR-579، گلیوبلاستوما، BAX، CDKN1A
متن کامل [PDF 611 kb]   (132 دریافت)    
نوع مقاله: مقاله پژوهشی |
دریافت: ۱۳۹۶/۱۱/۲۴ | پذیرش: ۱۳۹۶/۱۲/۱۵ | انتشار: ۱۳۹۷/۱۲/۲۰