جلد 10 - Summer 2008-                   جلد 10 - Summer 2008- صفحات 43-50 | برگشت به فهرست نسخه ها

XML English Abstract Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Amel Jamehdar S, Sabahi F, Forouzandeh M, Haji Abdolbaghi M, Kazemnejad A, Edalat R, et al . Application of SYBR-Green Real Time RT-PCR for quantification of human immunodeficiency virus type-1 (HIV-1) and comparison with COBAS AMPLICOR test. MJMS. 2008; 10 :43-50
URL: http://journals.modares.ac.ir/article-30-9162-fa.html
عامل جامه‌دار سعید، صباحی فرزانه، فروزنده مهدی، حاجی عبدالباقی محبوبه، کاظم‌نژاد انوشیروان، عدالت رزیتا، و همکاران.. به‌کارگیری روش Real Time RT-PCR با استفاده از رنگ سایبرگرین به‌منظور سنجش کمی ویروس نقص سیستم ایمنی انسانی نوع یک (HIV-1) و مقایسه نتایج به‌دست آمده با نتایج حاصل از روش کوباس آمپلی کور. پژوهش‌های آسیب‌شناسی زیستی. 1386; 10 () :43-50

URL: http://journals.modares.ac.ir/article-30-9162-fa.html


1- دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران
2- گروه ویروس شناسی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران
3- گروه بیوتکنولوژی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران
4- گروه بیماری‌های عفونی، مرکز تحقیقات ایدز ایران، دانشگاه علوم پزشکی تهران، تهران، ایران
5- گروه آمار زیستی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران
6- بخش ویروس شناسی انستیتو پاستور تهران، ایران
7- بخش بیوتکنولوژی انستیتو پاستور، تهران، ایران
8- گروه بیوتکنولوژی، انستیتو پاستور تهران، ایران
چکیده:   (3409 مشاهده)
هدف: در این تحقیق روش Real Time RT-PCRبا استفاده از رنگ سایبرگرین به‌منظور سنجش کمی ویروس نقص سیستم ایمنی انسانی نوع یک (HIV-1) راه‌اندازی شد. مواد و روش‌ها: ایـن آزمایش بر اســاس تــکثیر ناحیه ژن pol ویروس بوده و از دستگاه ترموسایکلرABI 7500 استفاده شد. 26 بیمار مبتلا به HIV-1 با این روش مطالعه شدند و سپس نتایج با آزمون تجارتی استاندارد کوباس آمپلی کور مونیتور تست (COBAS Amplicor HIV-1 Monitor Test)مقایسه شد. نتایج: نتایج حاصل از این تحقیق نشان داد که این روش قادر به اندازه‌گیری حداقل 500 کپی از HIV-1 RNA در هر میلی‌ لیتر است. علاوه بر این، آزمایش در محدوده 5-109×5 کپی از RNA ویروس در هر میکرو لیتر خطی است. از آنجایی که در هیچ کدام از افراد کنترل هیچگونه علامت مثبتی نشان داده نشد، ویژگی این روش 100 درصد محاسبه شد. اندازه‌گیری کمی HIV-1 در بیماران با استفاده از روش راه‌اندازی شده و روش استاندارد نشان داد که همبستگی بسیار خوبی بین دو روش وجود دارد (95/0=R2). نتیجه‌گیری: بر اساس آخرین اطلاعات موجود، شیوع HIV در جمهوری اسلامی ایران در یک وضعیت هشدار دهنده در حال افزایش است. از آنجایی که سطح پلاسمایی ویروس، مؤثرترین شاخص برای بررسی درمان بیماری است، اندازه‌گیری سطح پلاسمایی HIV-1 ابزار بسیار مهمی برای پیگیری فعالیت ویروس در افراد آلوده است. در این راستا راه‌اندازی و توسـعه روش‌های اندازه‌گیری HIV-1 RNA ابـزار منحصر به فـردی است که به پـزشک برای آگاهی از وضعیت درمان در بیمارانی که تحت درمان ضد رتروویروسی قرار گرفته‌اند کمک می‌کند. در این تحقیق روشSYBR-green Real Time RT-PCR را به‌منظور سنجش کمی HIV-1 در بیماران آلوده راه‌اندازی شد. از آنجایی که در این روش از RNA استاندارد سنتز شده استفاده شد، محدوده شناسایی بالادست در این روش بسیار بالاتر از روش استاندارد بود (109 ×5 در مقابل 105×5/7). بنابراین اگر نیازی به محدوده دینامیکی گسترده‌تری باشد- مانند موارد حاد بیماری- این استاندارد مفید خواهد بود. در این تحقیق تکرارپذیری در سطح درون سنجش (Intra assay) و بین سنجش (Inter assay) بررسی شد. ضریب تغییرات Ct به‌دست آمده در آزمون تکرارپذیری درون سنجش و بین سنجش به ترتیب کمتر از 3 و 5/4 درصد بود که نشان می‌دهد این روش تکرارپذیری بالایی دارد. با توجه به نتایج به‌دست آمده روش راه‌اندازی شده، می‌تواند جایگزین مناسبی برای روش استاندارد در سنجش کمی HIV-1 باشد.
متن کامل [PDF 353 kb]   (1644 دریافت)    

دریافت: ۱۳۸۸/۱۱/۶ | پذیرش: ۱۳۸۶/۶/۶ | انتشار: ۱۳۸۸/۱۱/۶

ارسال نظر درباره این مقاله : نام کاربری یا پست الکترونیک شما:
CAPTCHA code