Pathobiology Research
Pathobiology Research
mjms
Medical Sciences
http://mjms.modares.ac.ir
1
admin
2538-3000
2538-5887
en
jalali
1389
7
1
gregorian
2010
10
1
12
4
online
1
fulltext
fa
بررسی آثار حفاظتی آنتیبادیهای ضد فلاژلی سودوموناس آئروژینوزا بر عفونت سوختگی ناشی از آن در موشهای BALB/c
Investigation of protective effects of Pseudomonas aeruginosa anti-flagellar antibodies in burned-induced infection on BALB/c mice
هدف: سودوموناس آئروژینوزا بهعنوان یکی از مهمترین عوامل عفونت زخم و سپتیسمی در بیماران سوخته محسوب میشود. توسعه ایمنیدرمانی بهعنوان یکی از راهکارهای عملی برای مقابله با این باکتری محسوب میشود. فلاژل بهعنوان یکی از مهمترین عوامل بیماریزایی باکتری، نقش مهمی در اتصال، حرکت، کموتاکسی و تحریک پاسخ ایمنی با واسطه TLR5 دارد و از این رو بهعنوان کاندید واکسن مطرح است. تهیه آنتیبادی ضد فلاژلین و بررسی آثار حفاظتی آن در مدل موش سوخته هدف اصلی این مطالعه است.
مواد و روشها: در مرحله اول آنتیژنهای فلاژلی توسط اولتراسانتریفوژ تهیه شد. آنتیبادیهای ضد فلاژلی در خرگوش تولید و ناخالصیهای آن توسط پدیده جذب جدا شد. اختصاصی بودن آنتیبادیهای بهدست آمده برای آنتیژنهای فلاژلی توسط آزمونهای آگلوتیناسیون بررسی شد. پس از تعیین حداقل دوز کشندگی (LD50) از سویه مد نظر، رقتهای متفاوتی از آنتیسرم ضد فلاژلی برای انجام ایمنیزایی غیرفعال در موشهای سوخته تزریق شد. میزان انتشار و پخش باکتری از محل سوختگی با بررسی کمّی تعداد باکتریها در پوست و کبد تعیین شد. در این تحقیق علاوه بر سویه ATCC 27853 سودوموناس آئروژینوزا، سویه PA103 و یک ایزوله بالینی نیز برای آزمایشهای آگلوتیناسیون استفاده شد.
نتایج: آنتیسرم H توانست در 80 درصد موارد جلوی مرگ و میر موشهای سوخته شده و چالش شده با سویه ATCC 27853 را بگیرد. همچنین شمارش تعداد باکتریهای موجود در بافت کبد و پوست نشان داد که تعداد باکتریها در بافتهای موشهای تحت آزمایش در مقایسه با گروه کنترل بهصورت معنیدار کمتر است.
نتیجهگیری: نتایج این تحقیق نشان داد که آنتیبادیهای ضد فلاژلی سودوموناس با مهار تهاجم باکتری و اوپسونیزه کردن آن میتوانند در برابر عفونت ناشی از زخم سوختگی اثر حفاظتی داشته باشد.
Objective: Pseudomonas aeruginosa is the major cause of septicemia and wound infection in burned patients. Immunotraphy is the best practical way for prevention and treatment of these infections. Flagella as one of the most important bacterial virulence factors has important role in attachment, motility, chemotaxis and TLR-5-dependent immune response so that it propounded as a vaccine candidate. Production of anti-flagellar antibodies and evaluation of its protective effects in burned induced infection of mice was the main aim of this study.
Materials and Methods: In the first step, flagellar antigen prepared by ultra-centrifugation. Anti-flagellar antibodies produced in rabbit and its impurity separated by absorption technique. Specification of the obtained antibodies for flagellar antigen was investigated via agglutination test. After determination of LD50 in a known strain, different dilutions of anti-flagellar antibodies injected in burned mice for passive immunization. The rate of bacterial spread from burn site was determined by quantification assay of bacteria in skin and liver. In this study, clinical isolate and PA103 in addition to ATCC 27853 strain were used for agglutination test.
Results: H-antiserum reduced mortality of burned mice challenged with ATCC 27853 strains about 80%. Counting of bacteria in the skin and liver showed that the number of bacteria in immunized mice, in contrast with control group, was significantly low.
Conclusion: The results of this study showed that anti-flagellar antibodies of Pseudomonas can inhibit invasion of Pseudomonas and facilitate its opsonization, so these antibodies have protective effects in burned wound infections.
سودوموناس آئروژینوزا,فلاژل,اولتراسانتریفوژ,سوختگی,آنتیبادی
Pseudomonas aeruginosa,Flagellin,Ultra-centrifuge,burn,Antibody
1
10
http://mjms.modares.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1000-8028&slc_lang=fa&sid=30
Mohsen
Arzanloo
محسن
ارزنلو
100319475328460066637
100319475328460066637
No
M.Sc. Student, Department of Bacteriology, Faculty of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran
دانشجوی کارشناسی ارشد، گروه باکتری‎شناسی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران
Morteza
Sattari
مرتضی
ستاری
100319475328460066638
100319475328460066638
Yes
Associated Professor, Department of Bacteriology, Faculty of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran
دانشیار، گروه باکتری‎شناسی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران
Ahmad
Zavaran Hosseini
احمد
زوارانحسینی
100319475328460066639
100319475328460066639
No
Professor, Department of Immunology, Faculty of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran
استاد، گروه ایمنی‎شناسی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران
Sobhan
Faezi
سبحان
فائزی
100319475328460066640
100319475328460066640
No
M.Sc. Student, Department of Bacteriology, Faculty of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran
دانشجوی کارشناسی ارشد، گروه باکتری‎شناسی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران