Pathobiology Research
Pathobiology Research
mjms
Medical Sciences
http://mjms.modares.ac.ir
1
admin
2538-3000
2538-5887
en
jalali
1393
1
1
gregorian
2014
4
1
17
1
online
1
fulltext
fa
نقش دو پروتئین FhaB1 و FhaB2 وابسته به سیستم ترشحی دو جزئی در چسبندگی اسنیتوباکتر بومانی ATCC19606 به سلول اپیتلیال انسانی
Role of Two-Partner Secretion System dependent FhaB1 and FhaB2 Proteins in Adhesion of Acinetobacter baumannii ATCC19606 to Human Epithelial Cells
هدف: اسنیتوباکتر بومانی توانایی عجیبی برای کلونیزاسیون بر سطوح مختلف را داراست و چسبندگی روی سطوح به‏عنوان یک عامل بیماری‏زایی و اولین گام در انجام فرآیند کلونیزاسیون مطرح است. پروتئین‏های وابسته به خانواده سیستم ترشحی دوجزئی می‏تواند در چسبندگی باکتری نقش داشته باشد. هدف از انجام این تحقیق، شناسایی، مطالعه و بررسی نقش پروتئین‏های این خانواده در چسبندگی اسنیتوباکتر بومانی به سلول اپیتلیال انسانی است. مواد و روش‏ها: هومولوگ ژن‏های کد کننده پروتئین فیلامنت- هماگلوتینین وابسته به سیستم ترشحی دو جزئی در ژنوم اسنیتوباکتر بومانی با کمک نرم‏افزارهای بیوانفورماتیک در بانک ژنی تجزیه و تحلیل و سپس آغازگرها طراحی شد. بنابراین سازه‏های مورد نظر در ناقلpET22b سنتز و به سلول BL21(DE3) ترانسفورم و سلول‏های تراریخت شده FhaB1، FhaB2 نامگذاری شدند. میزان بیان پروتئین‏های نوترکیب بر سطح غشای سلول مطالعه و در نهایت میزان چسبندگی و توانایی برای تشکیل بیوفیلم در سلول‏های نوترکیب، اسنیتوباکتر بومانی و سلول اشریشیا کلی BL21(DE3) مقایسه شد. نتایج: بررسی‏های بیوانفورماتیک نشان داد که این باکتری توانایی تولید دو نوع اگزوپروتئین FhaB1، FhaB2 را داراست. بیان پروتئین‏های نوترکیب بر سطح خارجی سلول‏های تراریخت شده، با آزمایش‏های وسترن بلات و الایزای سلول کامل تأیید شد. آزمایش‏ها نشان داد که این سلول‏های نوترکیب و اسنیتوباکتر بومانی نسبت به سلول اشریشیا کلی BL21(DE3) توانایی بالاتری برای تشکیل بیوفیلم دارد. همچنین سلول‏های FhaB1، FhaB2 و اسنیتوباکتر بومانی نسبت به اشریشیا کلی BL21(DE3) به میزان بیشتری به سطح سلول‏های اپیتلیال ریه انسانی اتصال می‏یابند. نتیجه‏گیری: سیستم ترشحی دو جزئی در اسنیتوباکتر بومانی یکی از عوامل چسبندگی و کلونیزاسیون بوده و از جمله عوامل بیماری‏زایی باکتری است.
Objective:<em> Acinetobacter baumannii (A. baumannii)</em> has a good potential to colonize on various surfaces. As a virulence factor, adhesion to surfaces is the first step in colonization. The Two-Partner Secretion System (TPS) proteins are key factors for bacterial attachment. The purpose of this study is to identify and study the role of this family of proteins in adhesion of <em>A. baumannii</em> to human epithelial cells. Methods: Gene homologues that encoded the TPS were analyzed by bioinformatics tools and the primers were designed accordingly. The constructs synthesized in the pET22b vector were transferred to BL21(DE3). The transformed cells were named FhaB1 and FhaB2. The protein expression on the cell membrane was studied in addition to bacterial adhesion and biofilm formation by recombinant strains, <em>A. baumannii</em> and <em>E.coli</em> BL21(DE3). Results: Bioinformatic studies showed the bacterial potential of producing two exoproteins (FhaB1 and FhaB2). Expression of the recombinant proteins on the outer membrane was confirmed by Western Blot Analysis and whole cell ELISA. The results revealed an association between the recombinant cells and bacterial adhesion and biofilm formation. FhaB1, FhaB2 and <em>A. baumannii</em> exhibited enhanced adherence to human lung epithelial cells compared to <em>E.coli</em> BL21(DE3) Conclusion: TPS in <em>A.baumannii</em> is of adherence and colonization factors and is one of the bacterial virulence factors.
اسنیتوباکتربومانی,سیستم ترشحی دوجزئی,چسبندگی
Acinetobacter baumannii,Adhesion,Two-Partner Secretion System
51
62
http://mjms.modares.ac.ir/browse.php?a_code=A-30-1000-8445&slc_lang=fa&sid=30
Shakiba
Darvish Alipour Astaneh
شکیبا
درویش علیپور آستانه
100319475328460067178
100319475328460067178
No
Department of Biology, Faculty of Basic Sciences, Shahed University, Tehran, Iran
گروه زیست‏شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه شاهد، تهران، ایران
Iraj
Rasooli
ایرج
رسولی
100319475328460067248
100319475328460067248
Yes
Department of Biology, Faculty of Basic Sciences, Shahed University, Tehran, Iran
گروه زیست‏شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه شاهد، تهران، ایران
Seyed Latif
Mousavi Gargari
سید لطیف
موسوی گرگری
100319475328460067247
100319475328460067247
No
Molecular Microbiology Research Center, Shahed University, Tehran, Iran
مرکز تحقیقات میکروبیولوژی مولکولی، دانشگاه شاهد، تهران، ایران