Pathobiology Research
Pathobiology Research
mjms
Medical Sciences
http://mjms.modares.ac.ir
1
admin
2538-3000
2538-5887
en
jalali
1387
3
1
gregorian
2008
6
1
11
بهار و تابستان 87-
online
1
fulltext
fa
تعیین گونههای سارکوسیستیس گوسفندان ذبح شده در کشتارگاه زیاران قزوین با روش PCR-RFLP
Simultaneous molecular detection of Neisseria meningitidis and Haemophilus influenzae
هدف: سارکوسیستیس از شاخه اپیکمپلکسا است که زندگی دو میزبانه اجباری دارد. علفخواران (میزبان واسط) با خوردن آب و غذای آلوده به اسپروسیستها که توسط گوشتخواران (میزبان اصلی) دفع میشود، آلوده میشوند و متعاقب آن کیستهای نسجی در احشاء ایجاد میشود. هدف از مطالعه حاضر شناسایی گونههای مختلف سارکوسیستیس گوسفندان با استفاده از PCR-RFLP بوده است.
مواد و روشها: در مطالعه حاضر مجموعاً 60 نمونه بافتی از عضلات قلب، مری و دیافراگم از گوسفندان ذبح شده در کشتارگاه زیاران قزوین جمعآوری شد که 40 نمونه آن حاوی کیستهای ماکروسکوپی و 20 نمونه آن حاوی کیستهای میکروسکوپی بود. تخلیص DNA نمونهها با استفاده از کیت صورت گرفت. شرایط PCR برای تکثیر قطعه rRNA s18 بهینه شد. برای بررسی اختصاصی بودن، آغازگرهای نمونههای DNA نئوسپورا و توکسوپلاسما نیز در کنار نمونههای سارکوسیستیس تحت مطالعه قرار گرفت. برای تعیین گونه سارکوسیستهای تحت مطالعه، با توجه به موقعیت محل برش آنزیمهای برشدهنده، اقدام به انتخاب آنزیم شد.
نتایج: نتایج نشان داد که آغازگرها کاملاً اختصاصی بوده و جنس سارکوسیستیس را از سایرین متمایز میسازد. ارزیابی PCR-RFLP روی نمونهها نشان داد که کیستهای ماکروسکوپی متعلق به سارکوسیستیس ژیگانتهآ و کیستهای میکروسکوپی متعلق به سارکوسیستیس آریتیکنیس است.
نتیجهگیری: با استفاده از آغازگرهای طراحی شده و برمبنای روش PCR-RFLP گونههای سارکوسیستیس گوسفندی را میتوان از هم تفکیک داد. در این روش برای تفکیک گونههای متعلق به کیستهای میکروسکوپی گوسفندانTaqI و برای تفکیک گونههای متعلق به کیستهای ماکروسکوپیTaqI و HincII مؤثرتر از سایرین هستند.
Objective: Bacterial meningitis is a dangerous and sometimes fatal infection that affects the central nervous system. Because some antibiotics can prevent some types of these Bacteria and supress them from spreading and infecting, therefore it is important to know what type of virus or bacterium is causing meningitis.
Haemophilus influenzae and Neisseria meningitides are the two main pathogens causinig acute bacterial meningitis. Different methods are used for the detection of H. influenzae and N. meningitidis but they are of low sensitivity, taking long time and difficult to perform. Therefore, complementary methods are necessary for more sensitive detection of these agents.
Materials and Methods: In this study, a multiplex polymerase chain reaction (mPCR) assay was developed for detection of H. influenzae and N. meningitidis. These strains were confirmed by biochemical methods. Two specific primer pairs were designed for lic-1 and opa genes of H. influenzae and N. meningitidis respectively.
Results: DNA amplification product fragments were 150 bp and 320 bp for H. influenzae and
N. meningitidis, respectively. Streptococcus pneumoniae used as a negative control and did not yield a PCR product.
Conclusion: The results of this study indicated that PCR is a useful complementary diagnostic technique, especially when Gram stain, culture, or antigenic detection is negative or inconclusive.
سارکوسیستیس,سارکوسیستیس ژیگانتهآ,سارکوسیستیس آریتیکنیس
PCR-RFLP,rRNA s18,Detection,H. influenzae,N. meningitidis,Multiplex PCR assay
0
0
http://mjms.modares.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1000-9205&slc_lang=fa&sid=30
Abdolhossein
Dalimi
عبدالحسین
دلیمی
100319475328460066745
100319475328460066745
No
Professor, Department of Parasitology, School of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran
استاد، گروه انگل شناسی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران
Habibollah
Payekari
حبیب اله
پایکاری
100319475328460066749
100319475328460066749
Yes
Assistant Professor, Department of Parasitology, Institute of Razi Vaccine and Serum Research, karaj, Iran
استادیار، گروه انگل شناسی، مؤسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، کرج، ایران
Majid
Esmaeilzadeh
مجید
اسماعیل زاده
100319475328460066750
100319475328460066750
No
Instructor, Department of Biotechnology, Institute of Razi Vaccine and Serum Research, karaj, Iran
مربی، گروه بیوتکنولو‍ژی، مؤسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، کرج، ایران
Mohsen
Valizadeh
محسن
ولی زاده
100319475328460066751
100319475328460066751
No
Instructor, Department of Parasitology, Institute of Razi Vaccine and Serum Research, karaj, Iran
مربی، گروه انگل شناسی، مؤسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، کرج، ایران
Gholam Reza
Karimi
غلام رضا
کریمی
100319475328460066752
100319475328460066752
No
Assistant Professor, Department of Parasitology, Institute of Razi Vaccine and Serum Research, karaj, Iran
استادیار، گروه انگل شناسی، مؤسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، کرج، ایران
Gholam Reza
Motemedi
غلام رضا
معتمدی
100319475328460066753
100319475328460066753
No
Instructor, Department of Parasitology, Institute of Razi Vaccine and Serum Research, karaj, Iran
مربی، گروه انگل شناسی، مؤسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، کرج، ایران
Mohammad
Abdi Ghodarzi
محمد
عبدی گودرزی
100319475328460068593
100319475328460068593
No
Assistant Professor, Department of Parasitology, Institute of Razi Vaccine and Serum Research, karaj, Iran
استادیار، گروه انگل شناسی، مؤسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، کرج، ایران