Pathobiology Research
Pathobiology Research
mjms
Medical Sciences
http://mjms.modares.ac.ir
1
admin
2538-3000
2538-5887
en
jalali
1397
9
1
gregorian
2018
12
1
20
4
online
1
fulltext
fa
بررسی اثر سمی کروسین بر رده سلولی MDA-MB-468 بر اساس القای آپوپتوز، و تغییرات نشانگرهای تنش شبکه اندوپلاسمی و اتوفاژی
Evaluating the cytotoxic effect of crocin on MDA-MB-468 cell line based on apoptosis induction, ER stress, and autophagy markers
هدف: کروسین از ترکیبات عصاره زعفران است که خواص ضد سرطانی آن روی انواعی از سرطانها بهویژه سرطان پستان در مطالعات اخیر نشان داده شده است. با این حال، اطلاعات بسیار کمی از مکانیسم اثر این ترکیب موجود است. مطالعات قبلی، القای آپوپتوز در سایر سلولهای سرطانی تحت درمان با زعفران یا کروسین را نشان داده است. در این پژوهش با هدف بررسی اثر کروسین بر ردۀ سلولی MDA-MB-468 سرطان پستان، در نظر است تا بیان و شکستن کاسپاز 9، پیرایش و بیان پروتئین XBP1 و تجمع پروتئین LC3-II در تیمار شده با این ترکیب، بررسی شود.<br /> <strong>مواد و روش</strong><strong>‏ها</strong>: سنجش MTT برای بررسی اثر سمی کروسین بر رده سلولی نامبرده استفاده شد. سپس پیرایش ژن‏ XBP1 در سطح mRNA و بیان پروتئین پیرایش شده (XBP1s) بهترتیب با RT-PCR و وسترن بلات بررسی شد. بیان کاسپاز 9، کاسپاز شکسته شده و تجمع LC3-II نیز با روش وسترن بلات بررسی شدند. میزان بیان این پارامترها با استفاده از نرمافزار Image J بهصورت کمی گزارش شد.<br /> <strong>نتایج:</strong> کروسین بهصورت وابسته به دوز و زمان، موجب مرگ رده سلولی MDA-MB-468 شد. تیمار با کروسین، تغییر قابل توجهی در فعال شدن کاسپاز 9 و شکستن آن، در نتیجه افزایش نسبت Cleaved-Cas9/Cas9 داشت. پیرایش ژن XBP1 نیز پس از تیمار افزایش یافت. همچنین افزایش معنی‏دار بیان پروتئین پیرایش شده XBP1 (XBP1s) و تجمع پروتئین LC3-II و افزایش نسبت LC3-II/LC3-I در این سلول‏ها مشاهده شد.<br /> <strong>نتیجهگیری:</strong> نتایج نشان داد که این رده از سلول‏های سرطان پستان پس از تیمار با کروسین دچار آپوپتوز ‏شد. با توجه به تغییرات نشانگرهای مسیرهای UPR و اتوفاژی، احتمالاً این دو مسیر نیز در پیشبرد سلول به سمت مرگ سلولی و تنظیمات درون سلولی، نقش دارند.
<strong>Objective</strong>: Crocin, an important saffron ingredient, showed anticancer activity in a variety of cancer types, particularly breast cancer. However, little information is available on the mechanism of its action. Previous studies indicate apoptosis induction by crocin in some cancer cells. This study aims to investigate the effect of crocin on the MDA-MB-468 breast cancer cell line in order to investigate its effect on caspase 9 (Cas9) and cleaved-Cas9, expression and splicing of XBP1, and accumulation of LC3-II. <br /><strong>Methods</strong>: We used the MTT assay to investigate the cytotoxic effect of crocin on MDA-MB-468 breast cancer cells. Next, Cas9 and cleaved-Cas9 levels were evaluated by Western blot analysis. Splicing of XBP1 mRNA and expression of the spliced protein (XBP1s) was investigated by RT-PCR and Western blot, respectively. The accumulation of LC3-II was also evaluated by Western blot. The obtained results were analyzed and reported by Image J software. <br /><strong>Results</strong>: The results showed a time and dose-dependent cytotoxic effect of crocin in MDA-MB-468 cells. The expression of Cas9 and its cleavage, therefore, the ratio of cleaved-Cas9/Cas9 significantly increased. Crocin treatment led to a noticeable increase in splicing of XBP1 mRNA, expression of XBP1s, accumulation of LC3-II, and increased the LC3-II/LC3-I ratio in these cells. <br /><strong>Conclusion</strong>: The data have shown induction of apoptosis in these breast cancer cell lines after crocin treatment. Because of the observed changes in UPR markers and autophagy, it seems that these pathways are possibly involved in this process and in intracellular regulations.
سرطان پستان، کاسپاز 9 شکسته شده، تنش شبکه اندوپلاسمی، پیرایش XBP1، تجمع LC3-II
Breast Cancer,UPR,XBP1 splicing,LC3-II accumulation,Cleaved-Cas9
37
51
http://mjms.modares.ac.ir/browse.php?a_code=A-30-24779-1&slc_lang=fa&sid=30
Hamid
Heidarzadeh
حمید
حیدرزاده
100319475328460069910
100319475328460069910
No
Department of Clinical Biochemistry, Faculty of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran
گروه بیوشیمی بالینی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران
Seyede Zahra
Bathaie
سیده زهرا
بطحایی
100319475328460069908
100319475328460069908
Yes
Department of Clinical Biochemistry, Faculty of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran
گروه بیوشیمی بالینی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران
Saeid
Abroun
سعید
آبرون
100319475328460069909
100319475328460069909
No
Department of Hematology, Faculty of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran
گروه هماتولوژی، دانشکده علوم پزشکی دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران
Mohammad Ali
Mohagheghi
محمدعلی
محققی
100319475328460069911
100319475328460069911
Yes
Cancer Institute, Imam Khomeini Hospital, Tehran University of Medical Sciences, Tehran, Iran
مرکز تحقیقات سرطان بیمارستان امام خمینی، دانشگاه علوم پزشکی تهران، تهران، ایران