جوانمردی ستاره، اسدی محمد حسین، موحدین منصوره. جداسازی، تکثیر و غنیسازی سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی موش نوزاد در روش همکشتی با سلولهای سرتولی اتولوگ. پژوهشهای آسیبشناسی زیستی. 1391; 15 (4) :21-33
URL: http://mjms.modares.ac.ir/article-30-10207-fa.html
1- دانشجوی دکتری تخصصی، گروه علوم تشریح، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه اله، تهران، ایران
2- دانشیار، گروه علوم تشریح، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه اله، تهران، ایران
3- استاد، گروه علوم تشریح، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران
چکیده: (9968 مشاهده)
هدف: ارایه یک روش ساده برای جداسازی، تکثیر و غنیسازی سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی موش نوزاد مواد و روشها: سوسپانسیون سلولی حاوی سلولهای اسپرماتوگونی و سرتولی با استفاده از هضم آنزیمی از بیضه موش نوزاد دو روزه جداسازی شد. سلولها به صورت همکشتی و در محیط کشت DMEM/F12 حاوی 10 درصد سرم به مدت دو هفته کشت داده شدند. ماهیت سلولهای سرتولی و اسپرماتوگونی به ترتیب توسط بیان پروتئینهای ویمنتین وPLZF تأیید شد. برای ارزیابی میزان تکثیر سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی تعداد کلونیهای تشکیل شده و مساحت آنها در طول دو هفته کشت اندازهگیری شد. در پایان هفته دوم، بیان ژنهای اختصاصی سلولهای اسپرماتوگونی (Stra8، Piwill2، DAZL، Mvh) ارزیابی شد. نتایج: نتایج بهدست آمده نشان داد که سلولهای اسپرماتوگونی و سرتولی جدا شده نشانگرهای اختصاصی این سلولها را بیان میکنند. در طی دوره کشت، بین چهار نقطه زمانى اختلاف معنیداری در تعداد و مساحت کلونیهای سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی دیده شد (05/0Pنتیجهگیری: مطالعه حاضر نشان داد که همکشتی سلولهای اسپرماتوگونی و سلولهای سرتولی با منبع یکسان محیط رشد مناسب و بهینهای را فراهم میکند که بدون اضافه کردن عوامل رشد خارجی و دستکاریهای شیمیایی میتوان از آن برای تکثیر سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی استفاده کرد.
نوع مقاله:
مقاله پژوهشی |
موضوع مقاله:
سلولهای بنیادی دریافت: 1391/9/29 | پذیرش: 1391/11/28 | انتشار: 1391/11/29
* نشانی نویسنده مسئول: تهران |