Ahmadi E, Soleimanjahi H, Sadegizadeh M, Teimoori A. Rearranged Bovine Rotavirus Production through Cultivation of Virus by High Multiplicity of Infection (MOI) in Cell Culture and Amplification of Non-structural Genes using RT-PCR. Pathobiol Res. 2012; 15 (3) :1-9
URL:
http://mjms.modares.ac.ir/article-30-2837-fa.html
احمدی الهام، سلیمانجاهی حوریه، صادقی زاده مجید، تیموری علی. تولید روتاویروس گاوی بازآرایی شده از طریق تکثیر آن با نسبت بالای عفونتزایی ویروس به سلول در کشت سلول و تکثیر ژنهای غیر ساختمانی با روش RT-PCR. پژوهشهای آسیبشناسی زیستی. 1391; 15 (3) :1-9
URL: http://mjms.modares.ac.ir/article-30-2837-fa.html
1- دانشجوی کارشناسی ارشد، گروه ویروسشناسی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران
2- مدیر گروه ویروس شناسی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس
3- استاد، گروه ژنتیک مولکولی، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران
4- دانشجوی دکتری تخصصی، گروه ویروسشناسی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران
چکیده: (4933 مشاهده)
هدف: گروه A روتاویروس، مهمترین عامل ویروسی گاستروانتریت و اسهال شدید در نوزادن و کودکان و مسئول حدود 600 تا 870 هزار مرگ در سال است، بنابراین تشخیص و درمان این بیماری از اهمیت ویژهای برخوردار است. بازآرایی ژنها طی پاساژهای متوالی ویروس با نسبت بالای عفونتزایی در کشت سلول و همچنین در عفونتهای مزمن در بیماران با نقص ایمنی تشخیص داده شده است. در این مطالعه روش RT-PCR برای ردیابی، تشخیص و تکثیر ژنهای روتاویروس استاندارد و بازآرایی شده راهاندازی شده است. مواد و روشها: RNA روتاویروس از رده سلولی MA-104 آلوده استخراج شد و حضور ژنوم توسط الکتروفورز ژل پلی آکریل آمید 10 درصد و رنگآمیزی نیترات نقره، مشخص شد. تکثیر توالی کامل ژنهای کد کننده NSP1, 2, 3، با واکنش RT-PCR، برای روتاویروس استاندارد و بازآرایی شده، با آغازگرهای اختصاصی انجام گرفت. نتایج: بازآرایی در ژنهای NSP1, 3 با تغییر الگوی مهاجرت این قطعات در ژل، توسط الکتروفورز در ژل پلی آکریل آمید نشان داده شد. طول کامل محصولات ژنهای کد کننده NSP1, 2, 3 برای روتاویروس استاندارد و بازآرایی شده تکثیر شد و برای تعیین توالی ارسال شد. نتایج، شکلگیری قطعات ژنومی بازآرایی شده، طی پاساژ متوالی روتاویروس گاوی سویه RF را نشان داد. نتیجهگیری: تکثیر متوالی ویروس با نسبت بالای عفونتزایی در کشت سلول و همچنین عفونتهای مزمن در گروههای هدف با نقص ایمنی در تکامل آن نقش دارد و از طرف دیگرروشهای استفاده شده برای تعیین ویژگی به طور مداوم در حال تحول و تعریف مجدد است. با در نظر گرفتن تحقق موفقیت مطالعات روتاویروس و اهمیت زیاد توسعه واکسنهای روتاویروسی، مطالعه بیشتر جزئیات بازآرایی و جمعآوری داده برای فهم بهتر ویژگیهای آنتیژنیک و مولکولی ویروس لازم است. مطالعه حاضر اهمیت تنوع ژنتیکی را نشان داده و میتواند اطلاعات ارزشمندی در زمینه تکثیر، تنوع، زیستشناسی و تکامل روتاویروس را فراهم نماید.
نوع مقاله:
مقاله پژوهشی |
موضوع مقاله:
ویروس شناسی|ژنیتک مولکولی|بیماری های عفونی|ویروس شناسی پزشکی دریافت: 1391/7/1 | پذیرش: 1391/9/22 | انتشار: 1391/9/22
* نشانی نویسنده مسئول: تهران |