دوره 15، شماره 3 - ( 1391 )                   جلد 15 شماره 3 صفحات 93-102 | برگشت به فهرست نسخه ها

XML English Abstract Print

Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
Nematollahi L, Mahboudi F, Azizi M, Barkhordari F, Adeli A, Khalaj V. A Comparison of Bone Morphogenetic Protein-7 Mutant Expression in Prokaryotic and Eukaryotic Hosts. Pathobiol Res. 2012; 15 (3) :93-102
URL: http://mjms.modares.ac.ir/article-30-3632-fa.html
نعمت الهی لیلا، مهبودی فریدون، عزیزی محمد، برخورداری فرزانه، عادلی احمد، خلج وحید. مقایسه بیان شکل تغییر یافته BMP-7 در میزبان‏های پروکاریوتی و یوکاریوتی. پژوهش‌های آسیب‌شناسی زیستی. 1391; 15 (3) :93-102

URL: http://mjms.modares.ac.ir/article-30-3632-fa.html

مقایسه بیان شکل تغییر یافته BMP-7 در میزبان‏های پروکاریوتی و یوکاریوتی
لیلا نعمت الهی1، فریدون مهبودی2، محمد عزیزی3، فرزانه برخورداری4، احمد عادلی4، وحید خلج*5
1- دانشجوی دکتری تخصصی، گروه بیوتکنولوژی پزشکی، مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران
2- دانشیار، گروه بیوتکنولوژی پزشکی، مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران
3- دکتری تخصصی، گروه بیوتکنولوژی پزشکی، مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران
4- کارشناس، بیوتکنولوژی پزشکی، مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران
5- استادیار، گروه بیوتکنولوژی پزشکی، مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران
چکیده:   (4167 مشاهده)
هدف: BMP-7 عامل رشد چند منظوره‏ای است که اغلب به دلیل خواص استخوان‏زایی خود شناخته شده است. به دلیل قیمت بالا، دسترسی به این پروتئین برای مصارف درمانی محدود است. تاکنون تولید هترولوگ پروتئین نوترکیب BMP-7 در تعدادی از سیستم‏های بیانی انجام یافته است. در مطالعه حاضر شکل جدیدی از پروتئین در میزبان‏های پروکاریوتی و یوکاریوتی بیان شده است. مواد و روش‏ها: برای بیان در سیستم بیانی پروکاریوتی، پروتئین جدید به فضای پری‏پلاسمی باکتری اشریشیا کلی ترشح شد و تخلیص توسط ستون تمایلی انجام گرفت. برای بیان در سیستم بیانی یوکاریوتی، قطعه cDNA با طول کامل به سلول یوکاریوتی CHO منتقل شد و کلون‏های پایدار انتخاب شد. بیان پروتئین نوترکیب در هر دو سیستم بیانی توسط آزمون وسترن بلات تأیید شد. نتایج: پروتئین نوترکیب جدید به صورت دایمر با وزن مولکولی 36-38 کیلودالتون در سلول یوکاریوتی و به صورت مونومر با وزن مولکولی 16 کیلودالتون در سیستم بیانی اشریشیا کلی تولید شد. تجزیه و تحلیل کمّی با استفاده از الایزا نشان داد که سطح بیان جهش یافته در سیستم بیانی یوکاریوتی و پروکاریوتی به ترتیب 40 و 135 نانوگرم در هر میلی‏لیتر از محیط کشت است. نتیجه‏گیری: در این مطالعه سطح بیان پروتئین در اشریشیا کلی حداقل 3 برابر میزان بیان در سلول یوکاریوتی بود. با این وجود بهینه‏سازی‏های بیشتر برای به‏دست آوردن مولکول دایمر در اشریشیا کلی مورد نیاز است. نتایج مطالعه مذکور نشان داد که بیان پری‏پلاسمی ممکن است برای تولید پروتئین‏های پیچیده مانند BMPs مناسب باشد.
واژه‌های کلیدی: اشریشیا کلی، پروتئین نوترکیب، رده سلولی CHO، پروتئین استخوان‏زای انسانی رده 7
متن کامل [PDF 1062 kb]   (4065 دریافت)    
نوع مقاله: مقاله پژوهشی | موضوع مقاله: بیوتکنولوژی|بیوتکنولوژی مولکولی
دریافت: 1391/6/12 | پذیرش: 1391/9/8 | انتشار: 1391/9/19
* نشانی نویسنده مسئول: تهران
ارسال نظر درباره این مقاله : نام کاربری یا پست الکترونیک شما:
CAPTCHA